Perpetual Taq ДНК полимераза (hot start)
Предварителен комплекс с анти-Taq моноклонално антитяло, топ качествена термофилна Taq ДНК полимераза за автоматичен “hot start” PCR, резултиращо в изключително повишена амплификационна специфичност, чувствителност и добив.
Дефиниция за единица: една единица се дефинира като количеството ензим, необходимо да катализира инкорпорирането на 10 наномола дНТФ в киселинно разтворим материал за 30 минути при 74°C. Реакционните условия са: 50 mM Tris-HCl (pH 9.0 at 25°C), 50 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 200 μM от всяко дАТФ, дЦТФ, дГТФ, дТТФ (микс от небелязани и [3H]dTTP), 10 μg активирана телешка тимусна ДНК и 0.1 mg/ml BSA в краен обем от 50 μl.
Условия за съхранение: при -20°C
Описание:
- ултрачиста рекомбинантна Taq ДНК полимераза е обратимо свързана с анти-Taq моноклонално антитяло, блокиращо репликационната активност на ензима при умерена температура
- нашите внимателно подбрани анти-Taq антитела имат висока термална стабилност, осигуряващо защита срещу неспецифично удължаване на праймери на стайна температура до 70°C.
- Полимеразната активност се възстановява по време на началната стъпка на денатурация при загряването на амплификационните реакции на 94-95°C за поне 2 минути.
- Формирането на комплекси между Taq ДНК полимераза и анти-Taq антитялото формира основа за автоматичен “hot start” PCR, който позволява асемблиране на PCR реакция на стайна температура.
- Високата стабилност на комплексите позволява огромно повишаване на PCR специфичност, чувствителност и добив с сравнение с асемблирането по конвенционалния PCR метод.
- Автоматичният “hot start” PCR е бърз и удобен метод при асемблиране на множество PCR реакции.
- И повишената специфичност, и редуцираното погрешнп свързване на праймери подобрява мултиплексния PCR.
- Елиминиран риск от кръстосано замърсяване на матрицата и осигуряна безопасна лабораторна работа благодарение на отстранена необходимост от отваряне на горещи епруветки.
- Термостабилната Taq ДНК полимераза реплицира ДНК при 74°C и има полуживот от 40 мин при 95°C.
- Катализира полимеризацията на нуклеотиди в дуплексна ДНК с посока 5’3′ в присъствието на магнезиеви йони.
- Запазва 5’3′ екзонуклеазна активност.
- Няма 3’5′ екзонуклеазна активност.
- Добавя допълнителен A в 3′ краищата.
- Perpetual Taq ДНК полимераза се препоръчва за реакции на PCR и удължаване на праймерипри при повишени температури за получаване на широк диапазон от от ДНК продукти до 10 кб.
Буфер за съхранение:
- 20 mM Tris-HCl (pH 8.0 при 22°C), 100 mM KCl, 0.5% Tween™20, 0.5% Igepal CA-630, 0.1 mM EDTA, 1 mM дитиотреитол, 50% глицерол.
10 x реакционни буфери:
- 10 x Pol буфер A (оптимизационен буфер без MgCl2): Буферът позволява оптимизиране на концентрациите на MgCl2.
- 10 x Pol буфер B (общо приложение, за до 10 kb): Буферът съдържа 15 mM MgCl2 и е оптимизиран за употреба с 0.2 mM от всеки д НТФ.
- 10 x Pol буфер C (цветен): 10 x Pol буфер B обогатен с две проследяващи багрила и реагент за нанасяне на гел. Буферът позволява директно нанасяне на PCR продуктите върху агарозен гел.
Качествен контрол:
- Всички препарации се изследват за замърсяваща ендонуклеаза, 3’- екзонуклеаза, и неспецифични едино и двойноверижни Дназни активности. Типичните препарации са по-чисти от 95%, съдейки по SDS – полиакриламидна гелна електрофореза.
Допълнителна информация може да намерите тук.
Допълнителни документи и информация за поръчка
- Информация за поръчка:
Кат. № Разфасовка E2700-01
200 единици
E2700-04
500 единици
E2700-02
1000 единици
E2700-03 5000 единици - Производител:EURx